一、研究目的

化学药品生产过程中直接接触的工艺组件，可能与液体接触并发生相互作用，导致相关浸出物的产生和积累。浸出物在液体中持续存在并最终传递至终产品中，可能影响产品质量和/或患者安全。

本方案参考《化学药品注射剂生产所用的塑料组件系统相容性研究技术指南（试行）》、《化学药品与弹性体密封件相容性研究技术指导原则（试行）》和《化学药品注射剂与塑料包装材料相容性研究技术指导原则（试行）》等相关指导原则及法规要求，对烟台鲁银药业有限公司委托的直接接触药品的工艺组件进行相容性研究，研究内容包括：可提取物研究、分析方法开发与验证、浸出物研究、安全性评估。

可提取物研究即通过选择合理的模拟提取条件对工艺组件进行提取研究，预测可能迁移到药品的目标浸出物；方法学验证是对目标浸出物的检测方法的适用性进行验证；浸出物研究是确定目标浸出物及相关方法学验证基础上，检测迁移样品中浸出物的含量，与相关阈值进行比较，初步评估药品中浸出物的安全性；对于超出阈值的物质需进行毒理学评估，以进一步评估药品与工艺组件之间的相容性。根据以上研究内容为该工艺组件是否适用于药品生产提供依据。

二、样品信息及需求量

2.1 药品信息

表1：药品信息

2.2 组件信息 

表2：组件信息

2.3 浸出物研究用样品

表3：迁移试验条件及样品需求量

三、元素限度值和化合物的分析评价阈值

3.1 元素限度值

根据 ICHQ3D元素杂质指导原则，将PDE转换为浓度作评估药品或者其他组分中元素杂质含量的工具，即为元素限度值（concentration limit）。

元素限度值将参考 ICHQ3D、USP232、 Metal Reagents>、-Heavy Metals>和《化学药品注射剂与药用玻璃包装容器相容性研究技术指导原则（试行）》中“附件6：玻璃容器中常用金属元素的每日允许摄入量（注射途径）”，结合氯化钾注射液的每日最大用药量计算而得。ICH Q3D中指出，“将药品既定PDE值的30%定义为控制阈值，控制阈值可用于判断是否需要额外的控制。” 

3.2 化合物的分析评价阈值（AET）

阈值又叫临界值，相容性研究用化合物分析评价阈值，化合物的分析评价阈值（AET）有2种转化方法，即SCT法和PDE法，转化成AET时需结合产品的给药方式、给药方案、治疗周期等参数。

3.2.1 SCT转化为AET

SCT为安全性评估阈值（Safety Concern Threshold，SCT），当化合物低于SCT时，可认为化合物的含量非常小，其致癌性和基因毒作用可以被忽略，不会对患者产生安全性隐患，并不需要被报告，SCT与AET之间的转化计算公式为：

AET=SCT/日最大用药量×（1−50%），其中：50%为不确定度。

不同给药途径的SCT不同。目前欧洲药品局（European Medicines Agency，EMA）推荐的遗传毒性致癌物的安全性阈值（SCT）注射剂SCT为1.5μg/天，国际药用气雾剂联盟（International Pharmaceutical Aerosol Consortium，IPAC）推荐的吸入制剂SCT为0.15μg/天，注射制剂为1.5μg/天。

表4：硅胶的 AET

3.2.2 PDE转化为AET

PDE为人每日允许暴露量，主要针对由文献、毒性数据库能获得PDE的化合物，根据制剂的临床使用情况，如：每日最大使用剂量、给药方式等，计算得到分析评价阈值（AET），与分析测得的化合物浓度进行比较，得出该浸物水平是否符合安全性要求。PDE与AET之间的转化计算公式为：

AET=PDE/日最大用药量×（1−50%），其中：50%为不确定度。

四、提取试验研究

模拟提取试验是指采用合适的模拟溶剂（如缓冲液、有机相），在较剧烈的条件下，对工艺组件材料进行的提取试验研究；目的是通过提取试验，对可提取物（工艺组件材料中溶出的添加物、单体及其降解物等）进行初步的风险评估并明确潜在的目标浸出物，并依据提取试验研究中获得的可提取物种类和水平信息，建立灵敏的、专属的分析方法，以指导后续的浸出物研究（迁移试验）。

本项目将参考NMPA发布的指导原则如《化学药品注射剂生产所用的塑料组件系统相容性研究技术指南（试行）》、《化学药品与弹性体密封件相容性研究技术指导原则（试行）》和《化学药品注射剂与塑料包装材料相容性研究技术指导原则（试行）》，对氯化钠注射液注射液生产过程中用到的316L不锈钢、玻璃和硅胶进行模拟提取。

4.1 提取条件的选择

参考NMPA发布的《化学药品注射剂生产所用的塑料组件系统相容性研究技术指南（试行）》：开展提取试验时，应对提取方式、溶剂、提取比例、温度、时间等进行合理选择和设计。选择提取溶剂的关键因素包括：根据液体特点，考虑极性、pH、离子强度等，适当对提取溶液进行替换或者调整；提取溶液的用量应保证组件系统表面积与溶液体积比在合适范围内；提取温度和时间通常不低于实际生产过程中组件系统和液体之间的接触温度和时间；提取过程中组件系统的处理方式一般应与实际使用时的处理方式保持一致。

4.1.1、提取溶剂：基于上述指导原则，本项目将选择1）制剂、2）酸性提取溶液（pH=3，pH值应不高于药品的实际处方）、3）碱性提取溶液（pH=10，pH值应不低于药品实际处方）、4）50%乙醇溶液4个提取溶剂，进行提取试验研究。

4.1.2、提取条件：根据本品生产过程中接触最长时间19h、最高接触温度80℃，选择比生产工艺更剧烈的条件，100℃加热24h，进行提取试验研究。

表5：提取条件及检测项目

注：“√”为检测项目，“N.A.”为此项目检测不涉及。

4.2 提取样品溶液的制备

模拟溶剂1（制剂）：氯化钠注射液注射液。

模拟溶剂2（pH3缓冲液）：称取14.9g氯化钾，置1000ml聚四氟乙烯瓶中，用水稀释至刻度，配制成0.2mol/L的氯化钾溶液。用0.2mol/L盐酸调节pH至3±0.1。

模拟溶剂3（pH10缓冲液）：称取14.2g磷酸氢二钠，置1000ml聚四氟乙烯瓶中，用水稀释至刻度，并用0.1mol/L的盐酸溶液或氢氧化钠溶液调节pH至10±0.1。

模拟溶剂4（50%乙醇溶液）：量取无水乙醇500ml与500ml水，混匀，即得。

316L不锈钢提取液：将316L不锈钢切割成每段长为4cm，清洗干净后滤纸吸干，作为供试品，放入聚四氟乙烯瓶内，分成3组，每组2段（按双面计，总面积约为88cm²），第一组瓶内加入制剂75ml，第二组瓶内加入pH3缓冲液75ml，第三组瓶内加入pH10缓冲液75ml，于100℃加热24h后取出，即得提取样品1、2、3。以相应提取溶剂装入聚四氟乙烯（PTFE）瓶内同法作为空白溶液。

玻璃提取液：将玻璃切割成每段长为4cm，清洗干净后滤纸吸干，作为供试品，放入聚四氟乙烯瓶内，分成3组，每组1段（按双面计，总面积约为113cm²），第一组瓶内加入制剂95ml，第二组瓶内加入pH3缓冲液95ml，第三组瓶内加入pH10缓冲液95ml，于100℃加热24h后取出，即得提取样品4、5、6。以相应提取溶剂装入聚四氟乙烯（PTFE）瓶内同法作为空白溶液。

硅胶提取液：将硅胶管、硅胶垫清洗干净，滤纸吸干，硅胶管切成每段长为2cm，每个硅胶垫按通过圆心的两条垂直线剪成4块，每块再剪成4段（每段约1cm），作为供试品，放入聚四氟乙烯瓶内，分成4组，每组由两段硅胶管和一块硅胶垫组成（硅胶垫按双面计，硅胶管按内表面和外表面计，总面积为24cm²），第一组瓶内加入制剂30ml，第二组瓶内加入pH3缓冲液30ml，第三组瓶内加入pH10缓冲液30ml，第四组瓶内加入50%乙醇溶液30ml，于100℃加热24h后取出，即得提取样品7、8、9、10。以相应提取溶剂装入聚四氟乙烯（PTFE）瓶内同法作为空白溶液。

表6：供试品表面积

表7：供试品表面积与提取溶剂的比例

4.3 提取样品的检测

4.3.1元素检测

采用电感耦合等离子体质谱仪（ICP-MS），按表8拟定的项目，对不同工艺组件的3种提取样品溶液（不含有机溶液）中可能存在的元素进行定性全扫描（共73种）。

4.3.1.1所用仪器参数

表8：仪器及参数信息

注：仪器参数最终以实验结果进行适当调整为准。

根据元素全扫描结果，综合相关指导原则，及考虑各元素在自然界的丰度、工艺组件中存在的可能性，采用标准工作曲线法，对提取溶液中超出仪器检出限的元素进行半定量检测。

4.3.1.2元素半定量检测

根据氯化钠注射液注射液每日最大用药量所对应的工艺组件接触面积，将各元素的PDE换算成对应供试品溶液的浓度值，设计相应的线性曲线，对提取溶液中超出仪器检测限的元素进行半定量检测。扫描供试品溶液配制、元素限度浓度换算公式设计如下：

稀释剂：量取硝酸7.5ml，用去离子水稀释至1000ml，混匀，即得。

扫描供试品溶液配制：分别量取提取溶液各2.5ml，置不同25ml量瓶，用稀释剂稀释至刻度，摇匀，即得。

将元素PDE换算为供试品溶液中元素限度浓度的公式如下：

式中：

PDE：元素杂质的每日允许暴露量，μg/天 ； 

R：提取比例，cm²/ml；

M：每日最大用药量所对应的工艺组件接触面积，cm²/天；

D：前处理稀释倍数；

1000：L转换成ml的换算系数。

4.3.2挥发性/半挥发性物质检测（硅胶）

挥发性/半挥发物检测涵盖抗氧剂、增塑剂、环硅氧烷类等物质，使用气相色谱-质谱联用仪（GC-MS）完成检测。

量取各提取样品溶液适量（不含有机相），加入二氯甲烷，萃取，静置分层，取二氯甲烷层进行检测，结果将参考相关数据库进行分析。

4.3.3不半挥发性物质检测（硅胶）

不挥发物检测涵盖抗氧剂及降解产物、酯类、硫化物等，使用液相色谱-质谱联用仪（LC-MS/MS）完成检测。

量取各提取样品溶液适量进行检测，结果将参考相关数据库进行分析。

五、提取试验研究结果评估

5.1 元素杂质

将分析测试得到的各元素的浓度值，与计算的元素限度值比较，低于30%元素限度值的，则无需关注；高于30%元素限度值的元素，则需要在浸出物研究中进行检测。此规则不适用于注射途径需评估的元素及制剂中本身含有的元素。

5.2 有机杂质

将分析测试得到的可提取物的浓度值，与其分析评价阈值（AET）进行比较，低于AET时，无论是否具有致癌性，均可忽略其安全风险；高于AET时，则需要在浸出物研究中进行检测。

5.3 目标浸出物的确定

根据提取溶液中提取物的水平、可提取毒性评估结果，结合工艺组件材料配方，确定目标有机浸出物。对于浓度高于AET的元素杂质和有机杂质，可根据其积累水平、潜在安全风险、相关法律法规规定，并结合工艺组件配方选择有代表性的添加剂或者降解产物作为潜在目标浸出物，进行方法学研究，并在迁移试验中关注。

表9-1：目标元素确认依据

表9-2：目标有机浸出物确定依据

六、方法学验证

6.1 元素杂质

参考《中国药典》四部通则9101、ICH Q2、USP<232>、USP<233>对目标元素进行方法学验证，验证参数主要包括：系统适用性、专属性、线性及范围、检测限、定量限、准确度、精密度（重复性和中间精密度）、溶液稳定性等。具体操作与可接受标准如下表所示。

表10：元素方法验证及可接受标准

6.2 有机杂质

参考《中国药典》2020年版四部通则9101、《化学药物质量控制分析方法验证技术指导原则》、ICH Q2等对目标有机浸出物进行方法学验证验证参数主要包括：专属性、线性及范围、检测限、定量限、准确度、精密度（重复性和中间精密度）、耐用性、溶液稳定性。具体操作与可接受标准如下表所示。

表11：有机物方法验证及可接受标准

七、浸出物研究 

浸出物研究将根据实际生产过程中工艺组件和药品的接触情况，考察实际生产工艺中可能出现在药品中的浸出物信息。

研究样品优先选择由委托方提供的3批工艺液体进行测试，若实际条件无法实现，也可以提供0点或其他时间点的稳定性样品。

采用经过验证后的方法对以上样品进行元素和有机化合物的含量测试。

八、相容性研究结论

结合上述结果、评价，确认本品是否与工艺组件相容。